Formation : Méthodes modernes de cultures de cellules de mammifères :
Se former avec
DEPULP
- Renseignements :
- Durée : 4 Jours
- Type : En centre (inter)
- Diplômant : Non
-
Prix H.T. € :1293.00
- Objectifs :
- La majorité des méthodes de culture cellulaire utilisées ont été mises au point vers les années 1950-1960. Les progrès des connaissances de la biologie et de la physiologie cellulaire ont montré que ces méthodes ne correspondent pas à la réalité de l'in vivo. Les 2 stages proposés concernent l'optimisation des méthodes et permettent de se rapprocher de l'in vivo.
Cette formation vise l'étude des multiples paramètres intervenant en culture cellulaire.
L'accent sera mis tout particulièrement sur toutes les erreurs possibles souvent méconnues liées à la méthodologie de la culture et aux moyens de les circonvenir.
Chaque fois que cela sera nécessaire, les enseignants procèderont à une analyse critique des diverses possibilités (constamment réactualisées) pour résoudre les problèmes inhérents à la culture cellulaire.
- Public visé :
-
Toute personne faisant ou devant faire de la culture cellulaire. En dehors des notions de base en biochimie, aucune connaissance théorique ou pratique n'est nécessaire
- 1. Cultures primaires :
Méthodes d'obtention, sélection des cellules, élimination des cellules contaminantes.
2. Lignées cellulaires :
Lignées normales et tumorales. Hétérogénéité, cross - contamination. Dérive des propriétés. Clonage. Les cellules souches (Stem cells).
3. Techniques particulières de culture :
L'attachement cellulaire - diverses méthodes de détachement et de récupération des cellules. Les diverses variantes de cultures en monocouche (Culture sur matrices extracellulaires ou leurs éléments, matrices synthétiques, feeder layer). Culture en double chambre. Culture à l'interface air-liquide. Culture en trois dimensions (Sandwich, alginate, sphéroïde). Effet du mouvement du milieu (Shear stress), réalité physiologique. Etude des interactions entre divers types cellulaires. Coculture stromales - épithéliales.
4. Applications des cultures à la pharmacologie et à la toxicologie :
Les problèmes de culture étant analysés dans la première partie, ce chapitre sera restreint à l'analyse des aspects spécifiques de la pharmacologie et la toxicologie : stabilité et contamination des composés testés en culture - méthodes d'addition au milieu de culture - binding : cellules entières ou membranes - désensibilisation des récepteurs. Cultures d'hépatocytes, intérêt des cultures en 3 dimensions.
5. Etude immunocytochimique sur la culture cellulaire
6. Application à la biologie moléculaire :
étude des différentes méthodes de transfection cellulaire (transitoire et stable)
analyse de l'expression génique
7. Tests de prolifération, de toxicité et de viabilité cellulaire
8. Préparation et utilisation des cultures cellulaires pour l'étude de l'apoptose et l'analyse en cytométrie de flux
9. Application en oncologie :
préparation de culture cellulaire pour des modèles de xénogreffes et d'allogreffes chez l'animal
- Méthodes pédagogiques
Enseignement théorique avec discussion critique d'exemples trouvés dans la littérature spécialisée. Débats et échanges sur les problèmes évoqués par les stagiaires
Caractéristiques générales du stage
La majorité des méthodes de culture cellulaire utilisées ont été mises au point vers les années 1950-1960. Les progrès des connaissances de la biologie et de la physiologie cellulaire ont montré que ces méthodes ne correspondent pas à la réalité de l'in vivo. Les 2 stages proposés concernent l'optimisation des méthodes et permettent de se rapprocher de l'in vivo.
Cette formation vise l'étude des multiples paramètres intervenant en culture cellulaire.
L'accent sera mis tout particulièrement sur toutes les erreurs possibles souvent méconnues liées à la méthodologie de la culture et aux moyens de les circonvenir.
Chaque fois que cela sera nécessaire, les enseignants procèderont à une analyse critique des diverses possibilités (constamment réactualisées) pour résoudre les problèmes inhérents à la culture cellulaire
06/04/2009 au 09/04/2009 (67)
07/04/2008 au 10/04/2008 (67)
