Formation : Production de protéines biologiquement actives : systèmes procaryotes et eucaryotes
Se former avec
DEPULP
- Renseignements :
- Durée : 5 Jours
- Type : En centre (inter)
- Diplômant : Non
-
Prix H.T. € :1565.00
- Objectifs :
- Au terme de cette formation, les stagiaires devraient avoir acquis les bases de :
l'expression de protéines chez E. Coli
la transfection et l'expression transitoire de protéines hétérologues dans les cellules de mammifères en culture.
l'évaluation de l'expression par :
Electrophorèse des protéines Tests de solubilité
la chromatographie des protéines.
- Public visé :
-
Techniciens, ingénieurs et chercheurs de laboratoire qui souhaitent acquérir les techniques de base en expression, purification et analyse de la qualité des protéines recombinantes pour développer des stratégies de production de protéines d'intérêt
- Aspects théoriques :
Vecteurs d'expression procaryotes et eucaryotes
Système d'expression hétérologue des protéines chez E.coli, dans la levure Pichia pastoris et dans les cellules animales
Vecteurs viraux (Baculovirus, Adénovirus)
Techniques de transfection des cellules animales
Stratégies de production (optimisation du rendement et de la qualité)
Production de protéines solubles, sécrétées ou membranaires
Purification des protéines par chromatographie
Avantages et limitations des différents systèmes
Aspects pratiques :
Surexpression de protéines de fusion chez E. Coli (mise en situation avec la production de protéines difficiles)
Evaluation de la qualité des protéines (solubilité et autres tests)
Purification des protéines produites par chromatographie d'affinité
Transfection de protéines fluorescentes dans des cellules de mammifères en culture
Analyse par microscopie à fluorescence
Analyse par cytométrie de flux
- Méthodes pédagogiques
Exposés théoriques et travaux pratiques
06/10/2008 au 10/10/2008 (67)
