Université Paris Cité
Transfert de gènes dans les cellules eucaryotes - Biologie
Certification / expertise
28 heure(s)
2150 € TTC
Université
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Objectifs
Présentation - Transfert de gènes dans les cellules eucaryotes - BiologieLa formation, au travers de cours théoriques et d’applications pratiques portant sur des exemples concrets, abordera les différents types de transferts de gènes dans les cellules eucaryotes utilisés dans les laboratoires.
Elle permet à la fois d’avoir une vision globale de ces différentes techniques ainsi que leur mise en application en fonction des différents types cellulaires utilisés.
Cette formation permet ainsi de comparer les différentes techniques entre elles mais également entre différentes lignées par exemple non adhérente (jurkat) ou adhérentes (C2C12, HeLa).
Enfin, cette formation permet également d’aborder les notions de différents systèmes (rapporteurs GFP, luciférase) pour suivre le transfert de gènes dans ces cellules mais aussi le maintien de ces gènes après transfert
Compétences visées :
- Connaitre et comprendre les différentes techniques utilisées dans les laboratoires pour le transfert de gènes dans les cellules eucaryotes (transfection, électroporation, virus) ainsi que l’intérêt scientifique de chacune d’entre elles.
- Mettre en oeuvre et appliquer un protocole de transfert de gènes par des méthodes non virales.
- Savoir identifier les paramètres à ajuster pour optimiser un transfert de gènes en méthode non-virale en fonction du type cellulaire étudié.
- Obtenir les bases de l’utilisation de gènes rapporteurs luciférases par l’exemple de l’analyse d’une voie de transduction du signal.
- Avoir des connaissances théoriques sur l’établissement de lignée stable et leur criblage.
Public visé
- Technicien.nes, ingénieur.e.s et chercheur.e.s des entreprises et des collectivités dans le domaine des sciences du vivant.
- Conditions d’ouverture : 6 inscriptions minimum et 12 maximum.
Programme
Partie théorique :- Promoteurs eucaryotes, structure, fonctionnement.
- Généralités.
- Les techniques de transfert de gènes, adaptation aux différents types cellulaires.
- Les différentes méthodes de transfection.
- Vectorologies virales et non virales.
- Stabilisation de gènes.
- Les différents marqueurs de sélection.
- Stratégies de maintien des clones stables.
- Gènes rapporteurs et méthodes de mesure.
Partie pratique :
Optimisation et comparaison de différentes techniques de transfert de gènes :
- Électroporation et transfection à la lipofectamine ou au jet prime.
- Utilisation de trois lignées cellulaires : Une non adhérente (Jurkat) et deux adhérentes (C2C12 et HeLa) et une lignée primaire (myoblastes de souris).
Utilisation de différents gènes rapporteurs (GFP et Luciférase).
Analyse d’une sélection de clone de lignée inductible (Tet-on).
Etudes d’une voie de transduction du signal NFkB.
Des modifications mineures peuvent être apportées sous la responsabilité de l’encadrement pédagogique.
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Centre
Université Paris Cité
5 Rue Thomas Mann
75205 Paris cedex 13
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En résumé
Objectif
Certification / expertise
Durée
28 heure(s)
Coût
2150 € TTC
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