UNIVERSITÉ Paris Diderot

La cytométrie en flux avancé 2

Certification / expertise

5 jour(s)

2500 € TTC

Université

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Objectifs

Compétences visées :

  • Connaissance des techniques avancées de cytométrie.
  • Savoir réaliser un tri cellulaire sur un trieur FACS ARIAIII.
  • Savoir analyser des marquages polychromatiques sur LSRII.
  • Savoir réaliser et analyser une expérience à base de billes cytométriques (CBA et/ou Luminex).
  • Savoir réaliser le contrôle qualité des cytomètres BD.

Possibilité de mettre en œuvre des techniques supplémentaires à la demande des participants (prendre contact avec le responsable au moins 4 semaines avant le début de la formation).


Public visé

Techniciens, ingénieurs et chercheurs des entreprises et des collectivités dans le domaine des sciences du vivant.

Programme

Partie théorique :

Les bases de la cytométrie :

  • Introduction.
  • Fluidique.
  • Lasers et détecteurs de morphologie cellulaire.
  • Fluorochromes et détecteurs de fluorescence.
  • Compensations.
  • Les contrôles isotypiques.
  • Analyses.
  • Soft.
  • Contrôle qualité.

Les champs d’application de la cytométrie :

  • Marquage phénotypique (surface et intracellulaire).
  • Cycle cellulaire-Apoptose-Anomalies chromosomiques.
  • Réactions d’oxydation-Signal calcique-Marquage d’organelles.
  • Nouvelles applications : Analyse de la transduction du signal/Fluorescent Bar Coding/Mesure d’analytes solubles/Imaging des cellules en flux/Cytométrie de masse.
  • Fluorescent Activated Cell Sorting.

Partie pratique :

  • Des splénocytes stimulés in vitro seront mis à disposition des participants.
  • Un marquage CFSE ayant été réalisé avant le début de la stimulation, il sera possible d’étudier le nombre de cycles cellulaires effectués par ces cellules en fonction de diverses conditions de culture. Les cytokines présentes dans les surnageants de ces cultures seront étudiées par CBA. Des sous-populations spléniques seront triées par cytométrie en flux.
  • Marquages polychromatiques ≥ 6 couleurs sur BD LSRII avec traitement des compensations.
  • Cytometric Bead Arrays et lecture sur Luminex ou FACSARRAY.
  • Tri cellulaire sur trieur BD ARIA III.
  • Procédures de maintenance.
  • Contrôle qualité des cytomètres.
  • Analyses.
  • Présentations orales.
  • Table ronde et debriefing.

 

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En résumé

Objectif

Certification / expertise

Durée

5 jour(s)

Coût

2500 € TTC

Modes d'enseignement

En école ou centre de formation

Type d'établissement

Université

Domaine

Biologie

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